编号:ZK-9506

产品名称:

ER / PR / C-erbB-2免疫组化检测试剂盒

¥1,900.00


详细信息:
试剂盒内容:
试剂1:1mM EDTA pH8.0(50×)100ml
试剂2:A.兔抗人ER单抗工作液1.5ml
B.兔抗人PR单抗工作液1.5ml
C.兔抗人c-erbB-2单抗工作液1.5ml
试剂3:增强剂(即用型)4.4ml
试剂4:HRP标记抗兔IgG聚合物4.5ml
试剂5:A. DAB浓缩液(20×)1ml
B.DAB稀释液(即用性)20ml
试剂6:PBS磷酸盐缓冲液(1000ml/包)4包
阳性对照片3张(ER、PR、c-erbB-2各一张)
标本染色:1. 标本固定方法:
A. 石蜡标本推荐使用10%中性缓冲福尔马林。
B. 冰冻切片采用100%丙酮固定,4℃,10分钟。
2. 载玻片预处理
载玻片需经防脱片剂处理。可选择的试剂有APES(ZLI-9001)和多聚赖氨酸Poly-L-Lysine(ZLI-9006)或阳离子防脱玻片(ZLI-9506)。
3. 石蜡切片脱蜡至水。
4. 组织修复采用高温高压法:将试剂1用蒸馏水或去离子水50倍稀释后,适量加入至高压锅中。待高压锅内EDTA pH8.0 修复液沸腾后,放入切片,盖紧高压锅盖,待高压锅阀门喷气开始计时,一般修复时间为2.5-3 分钟。室温冷却20~30分钟,PBS冲洗。
5. 3% H2O2室温孵育5~10分钟,以去除内源性过氧化物酶。
6. PBS冲洗,2分钟×3次。
7. 擦干组织周围液体后滴加一抗。滴加试剂2A、2B或2C于切片上(ER或PR或c-erbB-2),37℃孵育2~4小时或4℃过夜。
8. PBS冲洗,2分钟×3次。
9. 滴加试剂3,室温或37℃孵育20分钟。
10. 滴加试剂4,室温或37℃孵育20分钟。
11. PBS冲洗,2分钟×3次。
12. 在1ml试剂5B中加入50μl试剂5A,制成DAB工作液。
注意:此工作液需避光保存,现用现配,配好后尽快使用,剩余液体不推荐再次使用。
13. DAB显色,保证5分钟。自来水冲洗,复染,脱水,封片。
结果判断:ER / PR着色为棕黄色颗粒,位于细胞核上;C-erbB-2着色为棕黄色颗粒,位于细胞膜,背景无颜色。
使用者自备的试剂:2%APES丙酮溶液(ZLI-9001 APES)或多聚赖氨酸(ZLI-9005/6)对玻片进行防脱片处理。
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