编号:DS-0004

产品名称:

双染检测试剂(抗小鼠IgG/AP+抗兔IgG/HRP)

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详细信息:
分类:检测系统
子分类:DS双染试剂盒
规格:60测试/盒,120测试/盒
主要成分:试剂1 内源性过氧化物酶阻断剂
试剂2 即用型组合二抗(HRP标记抗兔IgG+AP标记抗小鼠IgG)
试剂3 显色剂3A 显色剂3B
试剂4 显色剂4A 显色剂4B
检验方法:1) 脱蜡和水化石蜡切片置于新鲜二甲苯中,2缸,浸泡10分钟/缸;去除多余的液体后,置于无水乙醇中,2缸,浸泡2分钟/缸;去除多余的液体后,置于95%乙醇中,1缸,浸泡2分钟;去除多余的液体后,置于75%乙醇中,1缸,浸泡2分钟;去除多余的液体后,蒸馏水冲洗,置于Ultra冲洗缓冲液中。
2) 抗原修复 高压锅中,加入EDTA抗原修复液,高火预热;待修复液沸腾后将切片置于其中,并完全浸泡组织,盖好锅盖,扣上压力阀,高火继续加热;待限压阀开始转动喷气后调至中火,同时开始计时2.5分钟;计时结束后离开热源,放气降压后将高压锅移入冷水中冷却;待锅中液体冷却至室温后取出切片,Ultra冲洗缓冲液浸泡清洗2分钟×3次。
3) 滴加试剂1 加入50μL的试剂1(内源性过氧化物酶阻断剂),室温孵育10分钟;蒸馏水洗2次后甩干液体,用免疫组化笔在距离组织周围2-3mm处画圈;Ultra冲洗缓冲液浸泡2分钟×3次。
4) 根据检测需要滴加50μL 组合一抗或空白对照试剂,37℃孵育60分钟或2~8℃孵育过夜;Ultra冲洗缓冲液浸泡2分钟×3次。
5) 滴加试剂2 滴加50μL 试剂2,37℃孵育30分钟;Ultra冲洗缓冲液浸泡2分钟×3次。
6) 滴加试剂3 滴加50μL试剂3,室温孵育10-15min;Ultra冲洗缓冲液浸泡2分钟×3次。
7) 滴加试剂4 滴加50μL试剂4,室温孵育5-10min;自来水冲洗。
8) 复染 苏木素染色液室温染色30~60秒,自来水冲洗干净,晾干。注意:需要控制苏木素染色液的染色强度。颜色过浅或过深都会干扰显色结果的观察。
9) 水洗后返蓝
10) 快速脱水、透明、中性树胶封片。
11) 结果判读 在光学显微镜下对染色后切片进行观察和结果判读。
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